厭氧培養(yǎng)箱的操作流程

（一） 操作室厭氧環(huán)境形成：
　　1. 按使用要求放置好必要的附件和器具;
　　2. 通電源開(kāi)照明燈，開(kāi)溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度;
　　3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示紙
（封閉）;
　　4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén)，并抽真空校驗(yàn);
　　5. 操作室內(nèi)第一次置換（氮?dú)庵脫Q）：
　　A. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
　　B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y1，使手套鼓起，關(guān)閉閥門(mén)1，然后
扎緊袋口;
　　   6. 操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次充氮過(guò)程，取樣室先抽真空，
并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。如此連續(xù)三次氮?dú)庵脫Q。
　　   7. 操作室第四次置換（混合氣體置換）：（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、
CO2 5%）
　　　　  A. 調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣閥3進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室先抽真空，并隨時(shí)用
腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣;
　　　　  B. 關(guān)掉混合氣體閥3，并打開(kāi)閥5，使混合氣體經(jīng)過(guò)流量計(jì)，調(diào)整流
量計(jì)，流量為每分鐘10ml左右;
　　　　  C. 混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換，經(jīng)過(guò)上述過(guò)程，基本形成厭氧環(huán)境。
　　   8. 操作室內(nèi)打開(kāi)粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時(shí)
后打開(kāi)美蘭指示紙觀察其變色情況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
　　   9. 開(kāi)紫外線滅菌燈，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)：
　　1. 檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊;
　　2. 打開(kāi)取樣室外門(mén)，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén);
　　3. 取樣室充氮置換三次過(guò)程：打開(kāi)真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）
以上停，然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y2進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥2。第
二次重復(fù)操作一次。第三次操作時(shí)，使真空度500ml汞柱（66kPa）以
上停，然后打開(kāi)閥4進(jìn)混合氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥4。取樣室充
氮置換三次過(guò)程結(jié)束;
　　  4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
　　  5. 取樣室外門(mén)開(kāi)啟、關(guān)緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗(yàn);
　　  6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長(zhǎng)期連續(xù)使用的條件：
　　　　 A. 每天在操作室內(nèi)打開(kāi)美蘭指示紙觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣;
　　　　 B. 要長(zhǎng)期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通
過(guò)催化吸收，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml
左右;
　　　　 C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。
　　　　 D. 操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制。
　　  7. 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。